WI-38 VA 13 subline 2RA

Происхождение: человек, легкое эмбриона, клетки линии WI-38, трансформированные SV-40.

            Ann.Med.Exp.Biol.Fenn. 1966. 44: 242; J.Natl.Cancer Inst. 1964. 32: 917.

Морфология: эпителиоподобная

Способ культивирования: монослойный

Условия культивирования:  среда  - ЕМЕМ или ВМЕ с двойным набором аминокислот и витаминов

сыворотка -    эмбриональная бычья 10%

др. компоненты - NEAA 1%, пируват натрия 1mМ (ЕМЕМ)

процедура пересева - cнятие клеток, используя трипсин 0.25%: версен 0.02% (1:3), кратность рассева 1:3 - 1:6, оптимальная плотность 1.0-3.0х10⁴ клеток/см²

криоконсервация  -   ростовая среда, 5% DMSO, 1.0х10 ⁶ клеток/мл в ампуле

Жизнеспособность после криоконсервации:  80-85% (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)

Контроль контаминации: бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены

Контроль видовой идентичности:  кариологический анализ

Кариология: 2n= 46, пределы изменчивости по числу хромосом 45-89, модальное число хромосом 73-78, количество маркеров - 2-3 (рутинная окраска), 1-6 микрохромосом (АТСС).

Эффективность клонирования: 15% (АТСС)

Другие характеристики:

чувствительность к вирусам: простой герпес, везикулярный стоматит (Индиана), полиовирус 2, реовирус 3.

Изоэнзимы G6PD, B.

Наличие SV 40 neo (T) и трансплантационных антигенов.

Область применения: биохимия, трансформация, вирусология.

Коллекции: ATCC CCL 75.1; ECACC 85062512; ИНЦ РАН.

 

XPA

Происхождение: человек, фибробласты больных пигментной ксеродермой, трансформированные SV 40.

            Mol.Cell Biol. 1987. 7: 3353-3357.

Морфология: фибробластоподобная

Способ культивирования: монослойный

Условия культивирования:  среда  -  DMEM

сыворотка -    эмбриональная бычья 10%

процедура пересева - cнятие клеток, используя трипсин 0.25%: версен 0.02% (1:3), кратность рассева 1:3

криоконсервация  -   ростовая среда, 5-8% DMSO, 1.0х10⁶ клеток/мл в ампуле

Жизнеспособность после криоконсервации: 90% (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)

Контроль контаминации: бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены

Контроль видовой идентичности:  кариологический, изоферментный (ЛДГ и Г6ФДГ)  анализ.

Кариология: 2n = 46, пределы изменчивости по числу хромосом 64-75, модальное число 68-70, количество маркеров – 19% дицентриков (рутинная окраска), 7% клеток содержат микрохромосому, количество полиплоидов 5%.

 

Область применения: генетика, канцерогенез, клеточная биология.

Коллекции: ИНЦ РАН