Сотрудничество и помощь проекту
К огромному нашему сожалению, Российский Научный Фонд слишком жестко регламентирует деятельность групп, работающих при его финансировании. Это связано с тем, что принят специальный Федеральный закон Российской Федерации от 2 ноября 2013 г. N 291-ФЗ "О Российском научном фонде и внесении изменений в отдельные законодательные акты Российской Федерации". В этом законе есть специальная статья, внешне выглядящая весьма привлекательно: "Права на результаты интеллектуальной деятельности, созданные при выполнении финансируемых Фондом программ и проектов, принадлежат исполнителям этих программ и проектов". Однако на деле это означает, что в публикациях не должно быть соавторов и благодарности другим фондам (за исключением тех случаев, когда четко оговорено, кто что делал, например, мы обработали в пробах кладоцер - и это поддержано РНФ, а Вы - копепод - и это поддержано РФФИ)! Поэтому наши возможности в области сотрудничества с целью подготовки совместных публикаций в рамках этого проекта практически сведены на нет. Это прискорбно, поскольку у систематиков, например, принято брать в соавторы тех, кто собрал, идентифицировал и прислал новый вид, и т.д.
Однако это не означает, что мы сидим в Москве и никого видеть не желаем. Мы можем оказать помощь в определении ветвистоусых ракообразных из различных регионов России и других стран, провести специальные консультации по определению разных групп, и т.д. В некоторых случаях (не всегда!) вид можно определить по фотографиям, так что присылайте - посмотрим!
У нас есть просьба помочь проекту (естественно, нематериально!). При том, что в нашем распоряжении имеется огромный материал из различных регионов России и мира, коллектив крайне заинтересован в получении новых проб с ветвистоусыми ракообразными в крепком - не ниже 70% - спирте, пригодных для генетического анализа, а также пакетов ила для выведения некоторых видов из покоящихся яиц. Особенно важны ряд регионов, плохо представленных в нашей коллекции, но в целом мы берем абсолютно любые пробы отовсюду! Обещаем, что когда-то они найдут применение.
Ниже приводится инструкция по сбору проб для генетического анализа:
- 1. Заранее спасибо!
- 2. Пробы интересны из абсолютно всех водоемов, включая САМЫЕ маленькие, например, бочки с водой (очень перспективный водоем!) или наскальной лужи диаметром 20 см и даже следов копыт. Только при этом надо помнить, что водоемы, получившиеся от вчерашнего дождя не перспективны - там за день-другой никто еще не выведется. В соленых озерах (до 100‰, но не с морским солевым составом!) кладоцеры также встречаются в изобилии.
- 3. Для сбора проб в неком стоячем водоеме надо сначала оценить, это большой водоем, или нет. В случае маленького водоема берется она проба прибрежья и планктона (их и разделить невозможно). А в случае большого водоема - минимум две пробы, одна из прибрежья, а другая - путем закидывания сетки как можно дальше от берега и протягивания ее к берегу (только желательно около самого берега сетку из воды резко выдернуть, чтобы не коснуться дна и не зачерпнуть ила). В случае маленького водоема, через него протягивается сетка, при этом ее через заросли протягивать надо, а дна касаться не надо, иначе она моментально наполнится илом, который плохо фиксируется. В случае совсем маленькой лужи ее всю можно перечерпать сеткой или сачком. В случае отбора прибрежных проб в большом озере, весьма неплохо взять пробы отдельно в разных типах зарослей - там могут встречаться разные виды. А вот если брать формалиновые пробы, то нет никаких забот по илу, формалин все зафиксирует, только пригодной для анализа ДНК не сохранится.
- 4. Есть некоторые специальные местообитания, которые мы просим специально обловить под проекты по двум родам кладоцер (Eurycercus и Sida). А именно...
- А) В прибрежных зарослях развивается к осени много тины (нитчатых водорослей). Здорово было бы по тине поводить сеткой, а еще лучше - взять рукой тину и отжать в сетку. При этом из конечной пробы лучше тину удалить (уже после фиксации - см. ниже - зацепить пинцетом или даже веточкой, найденной на берегу - тина в баночке на нее легко наматывается), поскольку если тины в пробе будет много, то фиксация будет плохой.
- Б) Специальные кладоцеры встречаются на обратной стороне листьев кубышек-кувшинок и прочих растений с плавающими листьями. Поэтому хорошо там сеткой поводить (в том числе, прямо ей поскрести на обратной стороне плавающих листьев, можно также листья обмыть в сетке).
- 5. Стремнина реки - не особо интересное место. Однако в случае переправы на пароме через большую реку можно просто закинуть сетку за борт и ждать, когда туда течение набьет то, что река несет. Там попадутся захваченные течением особи (которые не обязательно относятся к данному району - они могут быть отнесены течением на тысячи километров). Заводи рек и прибрежные заросли - места весьма полезные, их облавливают так же, как и озера.
- 6. После извлечения пробы (для фиксации в спирту) надо удалить из нее воду, поскольку итоговая концентрация спирта (с учетом внесенной воды, особей и взвешенных в воде частиц) никак не должна быть ниже 70%, а лучше - 90%, иначе ДНК в ней погибнет. В случае сачка вода и сама утечет (можно ей помочь уйти путем сдавливания), а в случае сетки - надо вылить ее содержимое в специальный маленький сачочек. Тут же стоит выкинуть (если возможно) крупные палочки, листья, остатки высших растений (они могут ингибировать ДНК), и тину по мере возможности. Потом участок сетки или сачка, на который было высыпано содержимое стакана, макают в сосуд, в который планируется поместить пробу (мы чаще всего используем пенициллинки), в которую заранее заливают 96% спирт, и все туда стряхивают с газа по мере возможности. При этом не надо жадничать и набивать банку (вообще-то, можно разделить пробу на две или три). Спирта должно быть очень сильно больше, чем фиксируемого материала. Например, на дне пенициллинки должно быть не более 1 см особей и всяких прочих частиц, а спиртом она должна быть залита почти доверху, но не под самую пробку, а то воздушная пробка не даст банке хорошо закрыться. Пробу после фиксации стоит потрясти, перемешать. Если имеется возможность, то в лаборатории следует заменить спирт в пробе на свежий.
- 7. ОЧЕНЬ ВАЖНО ПОСЛЕ ОКОНЧАНИЯ ВСЕХ ОПЕРАЦИЙ СЕТКУ ВЫМЫТЬ. То же самое стоит сделать и перед последующим использованием, вымыв сетку уже в воде нового водоема. Иначе в последующей пробе окажутся животные из предыдущего водоема, что может привести к глубокой задумчивости о том, что речные виды делают в соленом озере и т.д...
- 8. В банку следует не забыть положить этикетку. Большой опыт работы коллектива показывает, что оптимальным способом этикетирования является простое нумерование проб. В банки помещается этикетка с номером, нарисованным простым карандашом на кусочке бумаги (лучше ватмане или плотной кальке). А в специальный блокнот необходимо записать всю информацию о водоеме - тип, размер, какая-либо информация, которая поможет его найти в будущем, ближайшая деревня, район, и т.д. Оптимально, конечно же, определить координаты водоема.
- 9. В случае перепадов температур, высот и т.д. (что особо важно на Севере, в пустынях и в различных горах), пробки из пенициллинок может повыбивать из-за перепадов давления. Так что предлагается пенициллинку, закрытую пробкой, потом перетянуть скотчем, обмотав вдоль ее продольной оси (так что пробка будет прижата скотчем к флакону). При этом надежность закрывания банки гораздо важнее ее внешнего эстетического облика.
- 10. Весьма важно собранные спиртовые пробы не хранить на свету - ультрафиолет ДНК разрушает. Если есть такая возможность, то спиртовые пробы желательно поместить в холодильник, а еще лучше - в морозилку. Это совершенно не означает, что они при комнатной температуре испортятся, но шанс для ДНК хорошо сохраниться более велик в холодильнике. Только, пожалуйста, формалиновые пробы в холодильник не помещайте - они замерзнут!
Инструкция по сбору ила для выведения из него ветвистоусых ракообразных.
Для сбора ила надо найти подходящий водоем - заранее известный, или приглянувшийся. Обычно на его краях есть подсушенные места (иногда очень большие, если в тропиках наступил сухой сезон). Оттуда-то надо зачерпнуть столько высохшего ила, земли и детрита сколько можно. При этом ил может быть абсолютно полностью высохшим, а может быть и влажным. Оптимальный субстрат - это высохшая тина (нитчатки), где может запутаться особенно много эфиппиумов. Пучки высохшей или влажной тины можно поискать отдельно и доложить в пакет. Если ил сухой - то на этом все закончено, его надо просто положить в целлофановый пакет (лучше зиповский), и не забыть положить этикетку, написанную простым карандашом или тушью на ватмане или кальке. В случае мокрого ила, его лучше высушить окончательно, например, под кондиционером - если так не сделать, то в тропиках все быстро порастет грибами и протухнет. Хранить пакеты с илом лучше в сухом, темном, прохладном месте.